Mol Cells. 2024 Sep 16:100112. doi: 10.1016/j.mocell.2024.100112. Online ahead of print.

RESUMO

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A determinação da constante de dissociação (K_d) é fundamental em bioquímica e farmacologia para entender as afinidades de ligação em reações químicas, o que é crucial para o desenvolvimento de medicamentos e a compreensão de sistemas biológicos. Aqui, apresentamos um método baseado em Transferência de Energia por Ressonância de Fluorescência de molécula única (smFRET) para determinar K_d, juntamente com o método convencional de Ensaio de Deslocamento de Mobilidade Eletroforética (EMSA) de K_d, oferecendo insights sobre interações termodinâmicas entre proteínas e substratos. A abordagem smFRET é destacada por sua capacidade de medir com precisão a cinética de ligação e dissociação por meio de marcação fluorescente e da natureza intrínseca das interações proteína-DNA, representando um avanço significativo nos campos da biologia molecular e farmacologia.

PMID:39293742 | DOI:10.1016/j.mocell.2024.100112