O promotor do Ubiquitin4 do amendoim impulsiona a superexpressão estável de genes e a edição eficiente de genes multiplex CRISPR/Cas9 no amendoim.

A biotecnologia em 2025: Promoção da eficácia da edição genética em amendoim (Arachis hypogaea) usando o promotor Ubiquitina (UBQ)

O desenvolvimento de ferramentas eficazes de transformação genética é crucial para o avanço da seleção molecular em amendoim (Arachis hypogaea). Neste estudo, identificamos e caracterizamos um promotor de Ubiquitina (UBQ) em amendoim e avaliamos seu potencial uso em pesquisas transgênicas. Utilizando identificação baseada na similaridade de sequências e análise de transcriptoma, selecionamos um gene UBQ altamente expresso, arahy.E356RC, designado AhUBQ4</i, do qual clonamos um fragmento de 973 pb da região promotora. Para avaliar sua atividade, utilizamos este fragmento promotor de AhUBQ4 para dirigir a expressão dos genes repórter GUS e Ruby em ensaios de expressão transitória e estável em tecidos de Nicotiana benthamiana e amendoim. Comparado com o promotor CaMV 35S comumente utilizado, o promotor AhUBQ4 apresentou atividade de transcrição estável e elevada em múltiplos tecidos. Além disso, substituímos o tradicional promotor 35S pelo promotor AhUBQ4 em um sistema CRISPR/Cas9, possibilitando uma edição gênica eficiente em amendoim. Utilizando um sistema de transformação de raízes pilosas de amendoim, induzimos mutações em locais específicos em HY5-HOMOLOG, confirmando a expressão estável da Cas9 pelo promotor AhUBQ4 para aplicações de edição genômica. Nossos achados destacam o potencial do promotor AhUBQ4 como uma valiosa ferramenta genética para melhorar a eficiência de transformação e a estabilidade da expressão gênica em amendoim, abrindo caminho para estudos avançados de genômica funcional e esforços de seleção molecular.

INFORMAÇÕES SUPLEMENTARES: A versão online contém material suplementar disponível em 10.1007/s42994-025-00230-7.

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PMID: 41312097 | PMC: PMC12647447 | DOI: 10.1007/s42994-025-00230-7

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