Química redox de aglomerados de ferro-enxofre e dissociação do dímero na proteína da membrana externa mitocondrial, mitoNEET

J Biol Inorg Chem. 28 de dezembro de 2024. doi: 10.1007/s00775-024-02093-7. Online antes da publicação.

RESUMO

A proteína da membrana externa mitocondrial conhecida como mitoNEET foi descoberta quando foi marcada por um derivado de fotoafinidade do medicamento antidiabético, pioglitazona. O papel biológico do mitoNEET e seu mecanismo específico para alcançar isso continuam sendo um tema ativo de pesquisa. Há evidências crescentes sugerindo que o mitoNEET poderia ser um componente da biogênese do cofator de FeS mitocondrial. A proteína era composta por um domínio associado à membrana N-terminal e um domínio C-terminal orientado para o citosol. O domínio citosólico era uma metaloproteína de ferro-enxofre (2Fe-2S) com um ambiente de coordenação raro 3Cys/1His. Foi relatado anteriormente que o mitoNEET formava dímeros que eram notavelmente sensíveis ao pH, provavelmente em consequência da protonação do ligante His-ferro único. A hipótese perseguida na pesquisa aqui relatada era que talvez a dissociação do mitoNEET também fosse sensível ao estado redox do aglomerado de ferro enxofre. Para usar a espectrometria de massa por ionização electrospray nativa (ESI-MS) para monitorar a reação de redução, foi concebido que o ditionito de amônio era o reagente apropriado para evitar a formação de adutos de íon sódio do ditionito de sódio. A preparação do ditionito de amônio foi atualizada e o composto teve as mesmas propriedades que o sal de sódio com corantes redox e a forma oxidada de glutationa. A dissociação do mitoNEET tratado com ditionito de amônio anaerobicamente foi prontamente evidente, uma vez que se descobriu que o ditionito de amônio era compatível com a química redox avaliada pela ESI-MS nativa.

PMID:39733200 | DOI:10.1007/s00775-024-02093-7