Orientações para a detecção de proteínas da membrana plasmática por biotinilação de superfície

Mol Cells. 2024 Dec 28:100174. doi: 10.1016/j.mocell.2024.100174. Online antes da impressão.

RESUMO

As proteínas da membrana plasmática são cruciais para a transdução de sinais, tráfico e interações célula-célula, todas vitais para a sobrevivência celular. Essas proteínas, incluindo receptores acoplados à proteína G (GPCRs), canais iônicos, transportadores e receptores, são alvos importantes de drogas devido ao seu papel central em receber e amplificar sinais celulares. No entanto, o isolamento e purificação de proteínas da membrana plasmática apresentam desafios significativos devido à sua integração com bicamadas de fosfolipídeos e à pequena fração dessas proteínas presentes na membrana plasmática. A biotinilação, em combinação com contas de estreptavidina, fornece um método eficaz para análise de proteínas de superfície, rotulando especificamente proteínas de superfície sem penetrar na membrana celular, possibilitando o isolamento e análise precisa com mínima contaminação. Neste estudo, descrevemos um método de um passo para analisar proteínas da membrana plasmática que pode ser rotineiramente implementado em muitos laboratórios.

PMID: 39736456 | DOI: 10.1016/j.mocell.2024.100174